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小鼠直腸平滑肌細(xì)胞

簡(jiǎn)要描述：小鼠直腸平滑肌細(xì)胞分離自直腸組織。直腸為大腸的未段，位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過(guò)盆膈，下端以肛men而終。

更新時(shí)間：2024-07-09
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
生產(chǎn)地址：上海
訪問(wèn) 量：314

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科研細(xì)胞

細(xì)胞系原代細(xì)胞

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詳細(xì)介紹

品牌	ATCC	貨號(hào)	YLK-XB0761h
規(guī)格	5*10^5	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	科研	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來(lái)源	直腸組織

小鼠直腸平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品名稱：小鼠直腸平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào) ：YLK-XB0761h

組織來(lái)源：直腸組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

直腸平滑肌細(xì)胞分離自直腸組織。直腸為大腸的未段，位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過(guò)盆膈，下端以肛men而終。直腸上端的大小似結(jié)腸，其下端擴(kuò)大成直腸壺腹，是糞便排出前的暫存部位，最下端變細(xì)接肛guan。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切，與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無(wú)縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中。2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏。

細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀。密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。直腸的動(dòng)脈血供主要是來(lái)自腸系膜下動(dòng)脈的直腸上動(dòng)脈，來(lái)自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸中動(dòng)脈和來(lái)自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸下動(dòng)脈。平滑肌收縮是胃腸蠕動(dòng)中基本的運(yùn)動(dòng)方式。腸炎時(shí)由于平滑肌特殊肌動(dòng)蛋白的增加導(dǎo)致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動(dòng)蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生，這進(jìn)一步證明了炎癥時(shí)的腸平滑肌細(xì)胞具有可塑性。利用腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)，可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結(jié)締組織對(duì)平滑肌細(xì)胞的反應(yīng)。

質(zhì)量檢測(cè)

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

培養(yǎng) 基：含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài) ：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

傳代比例：1:2

消化液：0. 25% 胰蛋白/酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95% 。C O2，5%

該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1) 收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。

3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。

4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。

5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。

注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，胰/酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。

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