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人胰腺星狀細胞

簡要描述：人胰腺星狀細胞正常胰腺組織中星狀細胞為靜止狀態(tài)，靜態(tài)的胰腺星狀細胞內含維生素A脂滴和油脂酸視/黃醇，并具有攝取和酯化視/黃醇的功能，但是不具備促纖維化作用。

更新時間：2024-07-09
廠商性質：生產廠家
生產地址：上海
訪問量：433

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科研細胞

細胞系原代細胞

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詳細介紹

品牌	ATCC	貨號	YLK-XB0533h
規(guī)格	5*10^5	供貨周期	現貨
主要用途	科研	應用領域	化工,生物產業(yè)
組織來源	胰腺組織

人胰腺星狀細胞

產品名稱：人胰腺星狀細胞

產品貨號：YLK-XB0533h

組織來源：胰腺組織

產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

細胞簡介：

正常胰腺組織中星狀細胞為靜止狀態(tài)，靜態(tài)的胰腺星狀細胞內含維生素A脂滴和油脂酸視/黃醇，并具有攝取和酯化視/黃醇的功能，但是不具備促纖維化作用。

致胰腺損傷的各種刺激因子使胰腺星狀細胞活化時，其細胞內脂滴消失，轉化為成肌纖維細胞樣的表型細胞，具有致纖維原性和平滑肌細胞的特點：與細胞外基質的主要成分如I型、Ⅲ型膠原蛋白、纖維連接蛋白、層粘連蛋白的抗體呈強陽性染色反應。提示細胞外基質的大量合成及沉積。此過程近來已經在動物模型及慢性胰腺炎患者的胰腺組織中得到證實。原位雜交顯示纖維化的胰腺中呈僅α-SMA染色陽性的細胞正是產生膠原的主要來源。

細胞特性

1) 細胞來源于人正常胰腺組織。

2) 細胞鑒定：結蛋白（Desmin)或者平滑肌肌動蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽性。

3) 經鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5) 細胞生長方式：長梭狀，星狀細胞，貼壁培養(yǎng)。

質量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

培養(yǎng) 基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài) ：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

傳代比例：1:2

消化液：0. 25% 胰蛋白/酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95% 。C O2，5%

該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化

1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化。

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

4) 待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。

3. 細胞收貨脫落

1) 收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化。

3) 經1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內。

4) 待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。

5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。

4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。

注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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