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植物硝態(tài)氮試劑盒說明書

發(fā)布時間:2023/4/10      點擊次數(shù):466

植物硝態(tài)氮試劑盒說明書

                                      微量法100T/96S

   意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

硝態(tài)氮是植物最主要的氮源。植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量反映了土壤中硝態(tài)氮的供應(yīng)情況,可作為土壤氮肥的指標(biāo)。測定植物體內(nèi)的硝態(tài)氮含量,不僅能夠反映出植物的氮素營養(yǎng)情況,而且對鑒定蔬菜和以植物為原料的加工制品的品質(zhì)也有重要的意義。

測定原理:

在濃酸條件下,NO3-與水楊酸反應(yīng),生成硝基水楊酸,硝基水楊酸在堿性條件下(PH>12)呈黃色,在一定范圍內(nèi),其顏色深淺與含量成正比,可比色測定計算得硝態(tài)氮含量

自備實驗用品及儀器:

蒸餾水、天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計/酶標(biāo)儀微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。  

試劑組成和配制:

試劑一:粉劑×2支,4℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每瓶加1.2mL濃硫酸充分溶解。

試劑二:液體60mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1支,4℃保存。

樣本處理:

按照質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL蒸餾水)加入蒸餾水,室溫勻漿后置于90℃恒溫水浴鍋中浸提30min,期間不斷晃動或者置于90℃恒溫?fù)u床中振蕩提取30min,待冷卻后于25℃,12000g離心15min,取上清待測。(深色植物勻漿后加入約3mg試劑三后再提?。?/span>

測定操作表:
分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至410nm,蒸餾水調(diào)零。

1、   EP管中如下表加樣


空白管

測定管

樣本(μL


10

蒸餾水(μL

10


試劑一(μL

20

20

充分混勻,25℃靜置30min

試劑二(μL

475

475

混勻,渦旋振蕩,使出現(xiàn)的沉淀充分溶解,轉(zhuǎn)移200uL至微量石英比色皿/96孔板中測定410nm處吸光值A,△A=A測定管-A空白管

注意:空白管只需測定一次。

計算公式:

a.    用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0156x+0.0073,R2=0.9997

NO3 N含量(mg/kg鮮重)=(△A-0.0073÷ 0.0156÷W÷V樣總)

               =64.1×(△A-0.0073÷W

V樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,g

a.        96孔板測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0078x+0.0073R2=0.9997

NO3 Nmg/kg鮮重)=(△A-0.0073÷ 0.0078÷W÷V樣總)

               =128.2×(△A-0.0073÷W

V樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,g

注意事項:

1.        試劑一配制好后盡快使用,4℃可保存一周。

2.        試劑一和試劑二均具有強(qiáng)腐蝕性,操作時需做好防護(hù)措施。

3.        Z低檢出限為g/g。



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